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      腦立體定位儀實驗過程中的注意事項

      發布時間:2022-01-07   點擊次數:220次
         腦立體定位儀是一種用于微創操作大腦的方法,通過腦圖譜和三維坐標系可以準確地定位大腦內部的小目標,并對其執行一些操作,例如消融(切除),活檢,病變,注射,刺激,植入等。哺乳動物的大腦是所有器官中最復雜的一部分,結構上分為很多區域和核團,在需要對某個特定核團進行研究的時候就需要通過立體定位技術對其進行精確定位和操作。
        
        在神經科學的研究方法中,為了使各種處理手段(給藥、毀損、病毒注射等)或信號采集(微電極、探針)到達目的腦區的相應位置,需要使用腦立體定位技術。
        
        下面詳細介紹腦立體定位實驗過程中的注意事項:
        1、首先根據以上的注意事項找準腦立體定位點。
        
        2、熒光、有色染料預實驗:在病毒注射之前,為了確定核團定位是否正確,推薦神經順行示蹤的DiI染料于注射后1周,神經逆行示蹤的熒光金(Flourogold)染料于注射后2周切片,并對照圖譜確認注射的核團位點無誤,再進行病毒注射,可有效提高病毒標記的成功率。冰凍切片時注意,先從所要核團外開始切(還不到核團所在層面),拿到的切片對照圖譜中的一些參照物來判斷核團是否準確(對照物可選大而清晰的海馬、視交叉,腦室、核團附近的特殊結構如纖維索等等),切片同時注意調節凍臺角度,使切片角度與圖譜一致。
        
        3、注意小鼠的狀態:由于俯臥體位以及腦立體定位儀的夾持,容易造成小鼠窒息死亡,因此需要隨時確認小鼠氣道通暢。另外,對于手術切開的部位,應適當滴加生理鹽水,防止傷口干燥。
        
        4、大鼠顱骨水平位定位操作:定位時將大鼠固定成顱骨水平位后,先定位到前囟,以前囟為原點,向前或向后、向左或向右、向下(先在顱骨上打孔)到達核團位置,需要強調的是,坐標是以前囟為原點,而不是以鉆孔后的腦表面為原點。
        
        5、熟能生巧:通過多加練習,最后能根據所用動物的體重對坐標做相應的修正,保證一定得準確率,立體定位也就成功了。

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